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詳細分析豬ELISA檢測試劑盒的技術流程

發布時間:2020-06-18   點擊次數:395次
  豬ELISA檢測試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬組織因子(TF)。用純化的豬組織因子(TF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加豬組織因子(TF),再與 HRP 標記的豬組織因子(TF)抗體結合,形成抗體抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬組織因子(TF)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中豬組織因子(TF)濃度。
 
  優勢:
  1、采用全進口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴格引進技術標準進行批量生產。
  2、先進的優化方案:穩定的重復性和可靠性。
  3、提供免費代測服務(為客戶提供來樣檢測服務,*限度實驗結果的有效性)
  4、產品質量保證,提供全程技術指導。
  5、友情提醒:試劑盒使用完畢后,請妥善處理相關耗材,避免環境污染!
 
  豬ELISA檢測試劑盒技術流程:(雙抗體夾心法)
  1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
  2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
  4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
  5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
  6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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