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豬ELISA檢測試劑盒在實驗中一定要多注意以下事項

發布時間:2020-06-26   點擊次數:366次
  豬ELISA檢測試劑盒的實驗原理:
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
 
  豬ELISA檢測試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
  1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,10×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
  3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
  5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
  注意事項:
  1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
  2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
  3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
  4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
  5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
  6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
  7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
  8、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
  9、不能使用過期產品。
  10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
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