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氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測試盒

發布時間:2021-03-24   點擊次數:29次

測定意義:GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態,也是谷胱甘肽氧化還原循環的主要指標之一。

測定原理:利用2-VP法測GSSG含量。

需要的儀器,耗材:低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。


樣本處理

(1)組織處理 新鮮組織首先用 PBS 沖洗 2 次,然后稱取動物組織或者植物組織 0.1g。加入用試劑一潤洗過的勻漿器中(勻 漿器提前放冰上預冷);然后加入 1mL 試劑一(組織/試劑一比例保持不變即可),迅速冰上充分研磨(使用液氮 研磨效果更好);8000g,4℃離心 10min;取上清液放置于 4℃待測,若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保 存 10 天)。


(2)血液處理 血漿:將收集的抗凝血于 4℃,600g 離心 10 分鐘,吸取上層血漿到另一支試管中,加入等體積的試劑一,4℃, 8000g 離心 10 分鐘,將上清移入新的試管中放置于 4℃待測,若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保存 10 天)。 血細胞:將收集的抗凝血于 4℃,600g 離心 10 分鐘,棄去上層血漿用 3 倍體積的 PBS 清洗 3 次(用 PBS 重懸血 細胞,600g 離心 10 分鐘),加入等體積試劑一,混勻后 4℃放置 10 分鐘,8000g 離心 10 分鐘,吸取上清放于 4℃ 待測,若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保存 10 天)。

(3)細胞處理 收集不少于 10 6個細胞,首先用 PBS 清洗細胞 2 次(PBS 重懸細胞,600g 離心 10 分鐘),加入 3 倍細胞沉淀 體積的試劑一重懸細胞,反復凍融 2-3 次(可在液氮中凍結,37℃水浴中溶解),8000g 離心 10 分鐘,收集上清于 4℃待測,若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保存 10 天)。

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