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SGCα, 肌糖αELISA試劑盒檢測方法

發布時間:2018-02-23   點擊次數:588次

供應 SGCα, 肌糖αELISA檢測試劑盒

 

試劑盒名稱 肌糖αELISA檢測試劑盒
 
規格 48T/96T
品牌 RENJIEBIO
檢測方法 ELISA酶聯免疫法
檢測波長 450nm
樣本 血清、血漿、細胞上清液等
樣本體積 50~100ul
研究領域 神經生物學、新陳代謝、免疫學等
使用范圍 僅用于科研實驗
保存 2~8℃,避光保存

 

 

肌糖αELISA檢測試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl?!?br />(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?br />(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min?!?br />(6)洗板,同(4)?!?br />(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?br />(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min?!?br />(9)洗板,同(4)?!?br />(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min?!?br />(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應?!?br />(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

肌糖αELISA檢測試劑盒標準曲線計算

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