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引起小鼠ELISA檢測試劑盒測定結果錯誤的原因

發布時間:2018-04-16   點擊次數:678次
  引起小鼠ELISA檢測試劑盒測定結果錯誤的原因
  
  小鼠ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法:
  
  1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心
  
  2、血漿-----應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心
  
  3、細胞培養上清---檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清
  
  4、組織標本-----切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用
  
  5、培養細胞-----檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
  
  小鼠ELISA檢測試劑盒常見問題解析:
  
  1.加樣量不一致?
  
  解決方法:樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
  
  2.樣品數量多少不一,加樣時間有長有短?
  
  解決方法:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。
  
  3.保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
  
  解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。
  
  ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。
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