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這么操作昆蟲elisa檢測試劑盒,的得到你想要的結果

發布時間:2018-09-26   點擊次數:1175次
   這么操作昆蟲elisa檢測試劑盒,的得到你想要的結果
  
  昆蟲elisa檢測試劑盒操作步驟:
  
  1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
  
  2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
  
  3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
  
  4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
  
  5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
  
  6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
  
  7、溫育:重復4的操作。
  
  8、洗板:重復5的操作。
  
  9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。
  
  10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
  
  11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
  
  12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
  
  昆蟲elisa檢測試劑盒注意事項:
  
  1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
  
  2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
  
  3、建議昆蟲elisa檢測試劑盒所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
  
  4、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。
  
  5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(0.1-200ng/ml范圍內),乘以總稀釋倍數即為樣本終濃度。
  
  6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。
  
  7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。
  
  8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用。
  
  9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
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